Das Mitte Museum sammelt Objekte, Dokumente und Archivalien, die über die Geschichte und Gegenwart des
Bezirks Mitte Auskunft geben. Sie gehen auf Personen, die hier gelebt oder gearbeitet haben, und auf Firmen, die hier ansässig waren oder sind, zurück.
Hinzu kommen Objekte aus der Geschichte der kommunalen und der militärischen Verwaltung. In der Kunstsammlung befinden sich Werke der Grafik, Malerei, Bildhauerei und Kleinplastik. Sie stammen von Künstler*innen, die ihren Lebensmittelpunkt im Bezirk hatten oder haben. Viele wurden zum Aufbau kommunaler Kunstsammlungen erworben (Tiergarten, Wedding). Andere entstanden im Rahmen der Künstlerförderung der Abteilung Kultur des Magistrats von Berlin (DDR).